sábado, 10 de enero de 2009

Eosina Azul de Metileno (EMB), Agar (Cultimed)

Se emplea como medio diferencial para el aislamiento y diferenciación de bacterias entéricas Gram-negativas.

Historia

Los primeros en desarrollar este medio fueron Holt-Harris y Teague, que a partir de la mezcla de azul de metileno y eosina consiguieron un efecto diferenciador muy claro entre las bacterias capaces de fermentar la lactosa y las que no lo
eran. La inclusión de la sacarosa fue propiciada para aquellos microorganismos que fermentan con dificultad la lactosa, y fácilmente la sacarosa.

Fundamento
Por la combinación de estos dos colorantes y los dos hidratosde carbono se pueden distinguir algunos géneros. Las bacterias lactosa-negativas y sacarosa negativas (Salmonella y Shigella) dan colonias incoloras, mientras que las lactosa y/o sacarosa-positivas dan colonias púrpura-violetanegruzco con/sin un centro oscuro y quedan rodeadas de una zona incolora. Por el efecto de estos mismos colorantes también queda inhibido el crecimiento de la microflora acompañante, sobre todo la Gram-positiva. También es posible la identificación de Candida albicans.

Fórmula (por litro)
Eosina Amarillenta .................................. 0,4 g
Azul de Metileno ..................................... 0,065 g
Lactosa .................................................. 5,0 g
Peptona Bacteriológica........................... 10,0 g
di-Potasio Hidrógeno Fosfato ................. 2,0 g
Sacarosa ................................................ 5,0 g
Agar........................................................ 13,5 g
pH final: 7,2 ±0,2

Preparación
Suspender 36 g en 1 l de agua destilada; calentar y agitar hasta ebullición y hervir durante 1 minuto. No sobrecalentar. Distribuir y esterilizar a 121ºC durante 15 minutos.

Modo de empleo
Sembrar en la superficie del medio.Incubar entre 35º y 37ºC de 18 a 24 horas.

Control físico-químico
Aspecto: polvo fino.
Color: púrpura rosado.
Solubilidad: opalescente con precipitado.
pH: 7,2 ±0,2

Control microbiológico
Los siguientes resultados fueron obtenidos a partir de cepas patrón, después de incubación a temperatura de 37ºC y observados a las 24 horas.

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